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濾紙、膠、膜之間的大小,一般是濾紙>=膜>=膠。 ·濾紙、膠、膜之間千萬不能有氣泡,氣泡會造成短路。 ·因為DEPF膜的疏水性,膜必須首先在甲醇中完全浸濕。而且在以后的操作中,膜也必須隨時保持濕潤(干膜法除外)。 ·濾紙可以重復利用,上層濾紙(靠膜)內吸附有很多轉移透過的蛋白質,所以上下濾紙一定不能弄混,在不能分辨的情況下,可以將靠膠濾紙換新的。 ·轉移時間一般為1.5 小時,( 1mA-2mA/cm2,10% gel),可根據分子量大小調整轉移時間和電流大小。 ·灌膠時盡量均勻,否則可能會出現氣泡。 ·為避免出現信號低的情況,最好選用高靈敏度的發(fā)光液,如enlight發(fā)光液等。 |
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