 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 2150 | 回復(fù): 10 | ||
mosaki銅蟲 (初入文壇)
|
[求助]
PCR如何入門 已有3人參與
|
|
|
大家好，小木蟲小白上來發(fā)帖，求助各位大神。 我是學(xué)中藥的，沒有生物基礎(chǔ)，最近因為接到項目開始做植物DNA提取，PCR反應(yīng)和酶切再跑膠，跑出來的膠真是一塌糊涂，求問各位，有什么書/刊物/方法能夠自學(xué)提升PCR和跑膠水平？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有206人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
cry_2013
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 47 (小學(xué)生)
- 金幣: 1960.8
- 散金: 342
- 紅花: 6
- 帖子: 366
- 在線: 246.6小時
- 蟲號: 3426497
- 注冊: 2014-09-18
- 性別: MM
- 專業(yè): 獸醫(yī)傳染病學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
PCR這個說簡單也簡單，說復(fù)雜也挺復(fù)雜的，我沒有專門學(xué)過PCR相關(guān)知識，做的也就是普通PCR，遇到問題也是從網(wǎng)上查查相關(guān)原因（其實也沒遇到過太大的問題。。。。。。），不過入門的話我覺得你應(yīng)該先查一下PCR原理，知道PCR是什么，也就知道每一步的意義了，然后就是模板、引物設(shè)計、擴(kuò)增程序這一塊吧，模板這塊現(xiàn)在的試劑盒感覺都不太差，按說明書操作一般問題都不大的（制備模板樣本太刁難除外啊），引物的話網(wǎng)上也有很多引物設(shè)計的方法和注意事項，我覺得模板質(zhì)量沒問題，引物只要二聚體，錯配什么的不要太過分（主要是3'端盡量不要有錯配），一般都沒問題的，擴(kuò)增程序這塊，你用的酶說明書上都有參考程序的，退火溫度我覺小范圍內(nèi)變化對擴(kuò)增結(jié)果影響不會太大，另外延伸的時間一定要夠啊，別說明書1000-2000bp/min就按2000走了，時間稍微寬裕點。另外跑膠不太好，如果是根本沒擴(kuò)出條帶就算了，如果marker都沒跑好，那肯定就是膠的問題了。我覺得PCR這個多做幾次，遇到問題解決問題，慢慢就有經(jīng)驗了。不過樓主專門找PCR相關(guān)的書籍去學(xué)習(xí)挺好的，我也想過看書的，最終沒看下去 ，以上廢話挺多的，樓主覺得有用的就參考，覺得沒用的就隨便看看。。。 |
8樓2019-03-15 14:26:16
lizimu566
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 21 (小學(xué)生)
- 金幣: 1834.1
- 散金: 14
- 紅花: 4
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 606
- 在線: 114.8小時
- 蟲號: 4221341
- 注冊: 2015-11-15
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2019-03-13 16:11:19
 本帖僅樓主可見 |
3樓2019-03-13 18:46:56
mosaki
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 73.3
- 帖子: 18
- 在線: 3.1小時
- 蟲號: 4021834
- 注冊: 2015-08-14
- 專業(yè): 中藥質(zhì)量評價
4樓2019-03-13 19:36:49
 |
5樓2019-03-14 09:05:02
6樓2019-03-14 11:04:36
mosaki
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 73.3
- 帖子: 18
- 在線: 3.1小時
- 蟲號: 4021834
- 注冊: 2015-08-14
- 專業(yè): 中藥質(zhì)量評價
7樓2019-03-14 11:20:24
旭日讀書
鐵桿木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 13085.5
- 散金: 285
- 紅花: 4
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 2392
- 在線: 674小時
- 蟲號: 3998838
- 注冊: 2015-07-31
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
|
我本科也是中藥的，碩士剛剛進(jìn)實驗室沒人教做分子生物學(xué)也是一塌糊涂，馬上研三畢業(yè)，熬過去回過頭來看，這一行真的是門檻相當(dāng)?shù)偷牧�。有熟人帶一個星期我覺得就夠了，多多請假會的人。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2020-03-18 13:53:16
匿名
用戶注銷 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 128 (高中生)
- 金幣: 4550.4
- 散金: 50
- 紅花: 22
- 帖子: 934
- 在線: 645.1小時
- 蟲號: 0
- 注冊: 2011-10-17
- 性別: GG
- 專業(yè): 植物遺傳學(xué)
10樓2020-03-18 17:17:49
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 mosaki 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0703 東華大學(xué) 理學(xué)化學(xué)均過 a 線，總分 281 求調(diào)劑 +6 | 香香 Lu 2026-03-03 | 11/550 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研]
 調(diào)劑的同學(xué)，走過路過，不要錯過
+3
|
likeihood 2026-03-06 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工354調(diào)劑 +4 | Lucy-xiao 2026-03-06 | 7/350 |
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +3 | 林小星發(fā)大財 2026-03-05 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085600，一志愿鄭州大學(xué)，280分求調(diào)劑 +7 | Wuqi725 2026-03-05 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 考研282分求調(diào)劑，接受跨專業(yè) +4 | 劉淄博 2026-03-04 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 歡迎采礦、地質(zhì)、巖土、計算機(jī)、人工智能等專業(yè)的同學(xué)報考 +10 | pin8023 2026-02-28 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 材料328求調(diào)劑 +10 | 一個蘿卜02 2026-03-03 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 264求調(diào)劑 +8 | 26調(diào)劑 2026-03-03 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 +5 | 2103240126 2026-03-02 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0855機(jī)械工程324求調(diào)劑 +3 | 鄭SK 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考博] 26申博 +5 | north， 2026-02-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 理學(xué)，工學(xué)，農(nóng)學(xué)調(diào)劑，少走彎路，這里歡迎您！ +8 | likeihood 2026-03-02 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 276求調(diào)劑 +8 | 路lyh123 2026-02-28 | 10/500 |
|
|
|
[考研]
材料270求調(diào)劑
 6+6
|
Eiiiio 2026-03-01 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 267求調(diào)劑 +6 | 釣魚佬as 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 化工270求調(diào)劑 +10 | 什么名字qwq 2026-03-02 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +11 | yunziaaaaa 2026-03-01 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 295求調(diào)劑。一志愿報考鄭州大學(xué)化學(xué)工藝學(xué)碩，總分295分 +8 | yl1 2026-03-02 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +6 | 愛擦汗的可樂冰 2026-02-28 | 7/350 |
|