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墨遺世獨立金蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助大家,我的主要問題是氨氮加氧酶(AMO)的提取及測量
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求助大家,我的主要問題是氨氮加氧酶(AMO)的提取及測量。 提。焊鶕(jù)文獻中超聲破碎條件,粗酶液制備過程為取15mL的污泥混合物,用pH = 7. 5的0.01mol/L磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液清洗三遍,重懸浮于pH = 7. 5 的緩沖溶液中,并進行超聲破碎(一個周期超聲15s,停置30s,共15min,置于冰水混合物中降溫)。之后進行離心(9000rpm,離心10min),上清液即為粗酶液。 測量:在兩個相同的離心管(50 mL)中每管含有1ml粗酶液、1ml 氯化銨(5.6mmol/l)和8ml 0.01m磷酸鹽緩沖液(pH=7.5)。離心管在30℃的空氣浴中搖動24小時,然后立即離心,測定上清液中氨氮的殘留量。 但是,結(jié)果不盡人意,明明硝化效果特別好的污泥,卻測不出來氨氮的降低。求助有沒有酶活的提取及測量的相關(guān)建議。 |
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