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happyaliii金蟲 (正式寫手)
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[交流]
多功能融合標(biāo)簽——多聚精氨酸(R9) 已有1人參與
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將重組蛋白與陽離子多肽(如九聚精氨酸, R9)融合是一種將重組蛋白轉(zhuǎn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)的方法。許多陽離子多肽具有穿透細(xì)胞的能力,這些多肽可以作為蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)結(jié)構(gòu)用于轉(zhuǎn)運(yùn)小分子藥和大分子(如蛋白質(zhì))。盡管轉(zhuǎn)運(yùn)的具體機(jī)制還不是特別清楚,但是這些多肽自身攜帶的大量正電荷對穿透功能是至關(guān)重要的?赡苁峭ㄟ^正電荷與細(xì)胞表面的陰離子分子(如硫酸肝素)的庫倫作用完成的。研究表明,多肽的長度和陽離子多肽的組成對內(nèi)化作用十分重要,一般認(rèn)為7-9氨基酸是最優(yōu)的。 與小分子不同,蛋白質(zhì)的構(gòu)象很脆弱,而且對功能至關(guān)重要,與九聚精氨酸的融合可能會對蛋白質(zhì)的構(gòu)象產(chǎn)生影響,進(jìn)而影響蛋白質(zhì)的功能。 20年前,人們用多聚精氨酸來純化蛋白;再近一些,人們將帶有6-精氨酸的GFP反相結(jié)合到云母片上;陽離子多肽也可以強(qiáng)烈的和塑料及玻璃表面進(jìn)行結(jié)合。 R9融合標(biāo)簽對蛋白的一些影響有: 1) 提高融合蛋白的正電荷,增強(qiáng)他們與陽離子交換柱的結(jié)合能力。 2) 可能會影響蛋白質(zhì)構(gòu)象穩(wěn)定性 3) 可以幫助蛋白質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi) 4) 可能會增強(qiáng)蛋白的細(xì)胞毒性 5) 幫助蛋白質(zhì)固定到玻璃或者云母片的表面。 |

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