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鐵(Fe)是人體中含量豐富的金屬元素,在生物學和病理學方面發(fā)揮著重要作用。鐵元素在生物體中主要以亞鐵(Fe2+)和鐵(Fe3+)離子的形式存在,由于生物體內的Fe3+容易被還原成Fe2+及在偏堿性的生理條件下溶解性不好;另一方面,生物體內的Fe2+會催化芬頓反應(Fenton reaction)產生自由基,可能引發(fā)一系列疾病。因此,設計一個快速、準確檢測生物體內亞鐵離子的探針具有十分重要的意義。 過氧亞硝基陰離子(Peroxynitrite anion, ONOO-)作為生物體內活性氮(Reactive nitrogen species, RNS)分子之一,它是由超氧自由基(O2·-)和一氧化氮(NO)反應生成。ONOO-作為很強的生物氧化劑,具有不穩(wěn)定性和較高的反應活性,是一些生物體內循環(huán)途徑的信號傳導分子。但這種傳導分子也可能對一些生物靶細胞造成不可逆轉的損害,比如引發(fā)癌癥、炎癥和心血管疾病等多種疾病。因此,設計一個合適的探針對ONOO-檢測顯得至關重要。 (一)設計合成探針K1檢測Fe2+。在苯并吡喃腈衍生物中引入氮氧化物(N-Oxide)合成熒光探針K1,探究探針K1與Fe2+發(fā)生反應可能的機理,并對其結構進行表征。本文通過光物理性質研究發(fā)現(xiàn),該探針在PBS/DMF=1:9(0.01 M, pH 7.4)緩沖溶液中幾乎沒有熒光,加入Fe2+后,N-Oxide被還原,熒光恢復,在波長685 nm處有最大發(fā)射。該探針具有選擇性好和靈敏度高(檢測極限為2.96×10-6 mM)等特點,被應用于秀麗隱桿線蟲和活體細胞中的Fe2+熒光成像。 (二)設計合成探針K2檢測ONOO-。以苯并吡喃腈和香豆素合成熒光探針K2,探究探針K2與ONOO-發(fā)生反應可能的機理,并對其結構進行表征。在HEPES/DMF=1:9 (0.01 M, pH 7.4)緩沖體系下進行光物理性質測試,當加入飽和當量ONOO-時,該探針熒光光譜發(fā)生明顯藍移,并且能夠實現(xiàn)對ONOO-的專一性識別,檢測極限低至6×10-7 mM。更重要的是,該探針被成功應用于活體細胞中的ONOO- 熒光成像。 ? 關鍵詞:亞鐵離子;過氧亞硝基陰離子;苯并吡喃腈;熒光探針;熒光成像 |

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