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bonnieqian新蟲 (初入文壇)
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[交流]
慢病毒轉(zhuǎn)染法制作穩(wěn)定細(xì)胞株 已有3人參與
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您好，我最近在做病毒轉(zhuǎn)染相關(guān)的實(shí)驗(yàn)，是將一些細(xì)胞因子（如，人的ceacam，CD4，CD38，CD47等）通過(guò)慢病毒系統(tǒng)轉(zhuǎn)染293T，使細(xì)胞因子表達(dá)在293T細(xì)胞的表面，其它都很順利拿到了單克隆，并且驗(yàn)證正確，只有ceacam做了幾次都沒(méi)拿到正確的克隆，減小藥篩濃度也沒(méi)有用，加藥就死的差不多了，幸免活下來(lái)的也是檢測(cè)陰性的，我思考到下面幾個(gè)原因，但是又都有疑惑，請(qǐng)大神幫我分析一下！非常感謝！ 1 基因本身沒(méi)有轉(zhuǎn)進(jìn)去，但 293T本身并不是很難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，并且重復(fù)了幾次了 2 基因轉(zhuǎn)進(jìn)去了，但是表達(dá)產(chǎn)物會(huì)使細(xì)胞死亡 ，這種情況有什么樣的思路可以解決 3 基因表達(dá)了，但是沒(méi)有到細(xì)胞表面，所以檢測(cè)不到，呈現(xiàn)陰性結(jié)果，可是與它幾個(gè)細(xì)胞因子一樣，我加了同樣的信號(hào)肽，為什么其他的出來(lái)了，困惑  |
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| 是不是你的這個(gè)在進(jìn)行病毒包裝的時(shí)候沒(méi)包裝好 |
bonnieqian
2樓2019-02-19 14:31:14
bonnieqian
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5樓2019-08-14 10:46:51
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