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[交流]
大腸桿菌高密度發(fā)酵溶氧控制
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請問大家做大腸桿菌工業(yè)發(fā)酵時，一定要控制溶氧在一定水平以上嗎？一般罐上培養(yǎng)前幾個小時 因為菌體密度比較低，一般還有溶氧顯示，可是長到OD600＝10左右，受限于通氣量和攪拌就不會有溶氧顯示了。 那么發(fā)酵全程要求有溶氧顯示是怎么實現(xiàn)的呢？只是簡單的提高通氣、攪拌？還是要通過精準的控制碳源或者氮源流加來實現(xiàn)？ 另外想請教一下，大腸桿菌高密度發(fā)酵實現(xiàn)的關鍵是什么？微量元素？通氣量？還是什么？先謝謝大家！期待…… 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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14026sun4樓2019-02-13 22:14:47
5樓2019-02-14 12:00:57
6樓2019-03-04 11:35:43
7樓2019-03-06 23:13:14
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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請問各位 小弟最近在做高密度發(fā)酵，因為之前實驗室都沒做過，所以在摸索階段。目前遇到的問題是菌體濃度上不去，OD600最大只能到30~40左右。 5L發(fā)酵罐，培養(yǎng)基主要成分：20g/L酵母浸粉，5g/L葡萄糖，10g/L NaCl, 15g/L磷酸氫二鉀，5g/L磷酸二氫鉀 通壓縮空氣 菌種：BL21(DE3)，做重組蛋白表達（無毒） 補料：葡萄糖，pH反饋補料 37℃培養(yǎng)6h左右初糖耗盡，這時候轉速達到1000rpm，通氣量3vvm，溶氧只有20%左右，OD600只有15左右，后面接著補料，OD600達到25左右就長不上去了，溶氧也只有2%，此時降溫到28度誘導，最終也只漲到35左右。 請教各位大神如何改進實現(xiàn)高密度��？看別人都可以做到OD600在100以上的。。。 |
8樓2019-05-22 10:19:47
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你的培養(yǎng)周期現(xiàn)在是多少？建議試試溶氧反饋補料，pH反饋沒法實現(xiàn)溶氧顯示的問題，最近也在試5L罐 28h能長到50左右了，共同學習  發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
9樓2019-05-30 01:58:18
10樓2021-08-11 13:59:38
簡單回復
time882樓
2019-02-10 21:12
回復
14026sun(金幣+5): 謝謝參與
14026sun3樓
2019-02-11 10:18
回復
額。。。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端
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