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瘋狂的熊貓

新蟲 (正式寫手)
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關(guān)于植物蔗糖合成酶與磷酸蔗糖合成酶問題
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SS和SPS經(jīng)本人幾次重復(fù)試驗未做出結(jié)果，主要是間苯二酚法加2M后沸水浴溶液變黃，我查了下可能是蔗糖的非酶褐變，也就是蔗糖的焦糖化反應(yīng)，導(dǎo)致最后溶液不顯色。目前本人有個思路，測酶時，調(diào)節(jié)反應(yīng)介質(zhì)ph7.0, 一個酶做兩管，一管做參比先沸水浴3分鐘殺酶，另一管測定，在反應(yīng)時間結(jié)束后沸水浴3分鐘終止反應(yīng)，之后均測反應(yīng)液的葡萄糖含量，用葡萄糖氧化酶法測定，參比吸光值-測定管即為蔗糖消耗量，根據(jù)葡萄糖標曲查值。還有葡萄糖含量的測定用到葡萄糖氧化酶法的話最好不要用到鄰聯(lián)茴香胺或者其鹽酸鹽，前者不容于水，后者雖然溶于水，但是它的溶解度跟溶液ph值相關(guān)，本評親測其鹽酸鹽在ph3.3~3.5或者更低的ph值才不會有沉淀產(chǎn)生！

補充一哈，考慮到終止反應(yīng)時沸水浴多多少少會引起生成蔗糖的水解，終止溫度的話換成70？或者80℃？然后迅速流水冷卻

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summerinsect

木蟲 (著名寫手)
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
不懂，幫樓主頂一下，讓大神來解答吧

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98樓2019-02-02 16:45:03
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