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如何提高病毒感染實(shí)驗(yàn)效率？
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可使用病毒感染增強(qiáng)劑envirus提高病毒的感染效率，下面以慢病毒為例，說一下實(shí)驗(yàn)過程。 1.提前一天細(xì)胞鋪板 提前一天將細(xì)胞種植在24孔板中，以感染時(shí)細(xì)胞融合度在50%左右為宜(懸浮細(xì)胞根據(jù)需要調(diào)整，不要采用過高的細(xì)胞密度)。 2.感染 ⑴將2ul的EnvirusTM-LV用25μl無血清稀釋液稀釋，充分混勻，制成EnvirusTM-LV稀釋液。4℃靜置5分鐘。 注：感染懸浮細(xì)胞，建議增大EnvirusTM-LV到推薦用量的1-3倍，這樣感染效果更好。 ⑵將適量病毒原液或稀釋液與EnvirusTM-LV稀釋液輕柔混勻，4℃靜置15分鐘。 ⑶將上述混合液加入到含完全培養(yǎng)基的細(xì)胞上，37℃培養(yǎng)8小時(shí)后觀察細(xì)胞狀態(tài)，如沒有明顯變化，不要更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)后常規(guī)更換培養(yǎng)基。由于慢病毒感染較慢，一般在感染96小時(shí)后觀察結(jié)果。 注：適當(dāng)減少感染時(shí)的細(xì)胞培養(yǎng)基量可以增加感染效率，但也可能增加細(xì)胞毒性。如出現(xiàn)細(xì)胞毒性可增加培養(yǎng)基量或更換培養(yǎng)基。 |
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