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鯤407新蟲 (初入文壇)
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[求助]
做western出現(xiàn)了一個問題，想請各位老師們幫忙分析一下，期待回復(fù)，感謝！ 已有1人參與
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本人剛開始做western，想請教一下大家，我曝的 actin，轉(zhuǎn)膜的時候電流400ma，轉(zhuǎn)了70min，然后發(fā)現(xiàn)marker不只轉(zhuǎn)到膜上了，也轉(zhuǎn)到濾紙上了，而且三層濾紙都轉(zhuǎn)上了，然后我去曝光的時候發(fā)現(xiàn)膜上什么也沒有，我就懷疑是不是我轉(zhuǎn)膜的時候過轉(zhuǎn)了，蛋白都轉(zhuǎn)濾紙上了，所以才沒曝出來。 可是別的實驗室也有400ma轉(zhuǎn)70min的，也能做出來，也沒出現(xiàn)過marker轉(zhuǎn)到濾紙上的情況，所以想請教樓主這是什么原因，有的老師說轉(zhuǎn)膜的時候就算時間長了也不會過轉(zhuǎn)的，蛋白質(zhì)會和膜結(jié)合在一起，所以還想問一下轉(zhuǎn)膜時到底會不會出現(xiàn)過轉(zhuǎn)的情況。感謝！ @gyesang 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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5樓2019-01-20 11:08:52
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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樓上正解，應(yīng)該是轉(zhuǎn)過了，推薦一篇wb操作方面的綜述供參考吧： https://www.labome.com/method/We ... s-and-Reagents.html |
3樓2019-01-20 10:12:20
鯤407
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4樓2019-01-20 11:08:25
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