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[交流]
糞便提取DNA
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| 糞便中提取HP的DNA,糞便中抑制物較多，比較難處理，請問有沒有好的提取方法？ |
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cizhenhua
木蟲 (正式寫手)
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4樓2020-03-19 11:22:01
★ ★
別踩我的菜: 金幣+2, 感謝 2019-01-21 15:45:39
別踩我的菜: 金幣+2, 感謝 2019-01-21 15:45:39
| 糞便首先要做預(yù)處理：糞便標本加人裝有2mL無菌PBS緩沖液(0.05mol/L，pH 7.4)試管中充分振蕩搖勻5～10min后3000轉(zhuǎn)/分（rpm）離心5min，收集上清液，此步驟重復(fù)2次,最終收集上清液每份1ml置于1.5ml 離心管中。然后上清液12000rpm離心l0min，棄上清后，沉淀物在lmL雙蒸水(ddH20)中懸置，混和后12000rpm離心5min，此步驟重復(fù)2次，收集沉淀。接下來的步驟就是用酚氯仿的抽提的方法。不過這種化學(xué)法花費時間長效果也不一定好，而且苯酚氯仿什么的有毒，用試劑盒操作就安全 簡便多了，時間短，差不多半小時就可以了。常用的有凱杰QIAGEN，天根tiangen，百代BIOG等。 |
2樓2019-01-18 08:35:47
3樓2019-03-13 08:56:52
佛魔不二
新蟲 (初入文壇)
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5樓2020-05-04 22:49:54
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