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七弦凝霜丶鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
多肽藥物體內(nèi)藥物分析的血漿樣品處理方法求助 已有1人參與
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本人做一條合成18肽新藥的藥代動，分子量2130Da，使用HPLC內(nèi)標(biāo)法進(jìn)樣分析（條件有限用不上串聯(lián)質(zhì)譜），現(xiàn)在在血漿樣品預(yù)處理過程卡住了，使用過幾個(gè)方案處理血漿樣品測回收率，都是乙腈沉淀，結(jié)合氯仿或二氯甲烷反提的方法，但是目標(biāo)藥物基本不出峰，考慮是不是藥品和血漿蛋白都被乙腈沉淀掉了？但是看文獻(xiàn)中處理血漿蛋白干擾大多數(shù)都是用沉淀法，急求做過多肽藥物的高人指點(diǎn)，推薦一些可行的血漿樣品提取方案。這周末希望能制定新的方案，下周繼續(xù)跑樣品！ 甲醇沉淀也試過，但檢測波長是220nm，甲醇有干擾后來就不用了。 ①200μl空白血漿，加入藥品（A6）與IS各50μl，300μl乙腈沉淀，渦旋1min，15000rpm離心10min，小心提取上清液，加入600μl二氯甲烷，（提取后加藥的樣品此時(shí)加入A6與IS，空白血漿提取之前不加藥），渦旋1min，15000rpm離心10min，提取上層水層進(jìn)樣20ul。 ②200μl空白血漿，加入300μl乙腈沉淀，渦旋1min，15000rpm離心10min，小心提取上清液，加入600μl二氯甲烷，此時(shí)加入A6與IS各50μl，渦旋1min，15000rpm離心10min，提取上層水層進(jìn)樣20ul。 A6在15.5min出峰，IS在20.5min出峰，但是血漿樣品中并沒有。14min有一特別大的血漿蛋白的峰，一直除不掉。 |
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- 專業(yè): 藥物代謝與藥物動力學(xué)
2樓2019-02-25 12:03:36
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