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單抗高聚體LC-MS分析 已有1人參與
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各位大俠: 單抗經(jīng)SEC餾分收集高聚體,濃縮后進(jìn)行LC-ESI-MS實(shí)驗(yàn),現(xiàn)在用的 Zenix-C SEC-150的柱子,流動(dòng)相為80%H2O、20%乙腈、0.05%TFA,結(jié)果顯示TUV圖中顯示一個(gè)峰,解卷積后質(zhì)量為單體和二聚體,豐度比例為10:1,請(qǐng)問(wèn)有什么方法可以將單體和二聚體分開(kāi)?或者關(guān)于高聚體質(zhì)譜分析實(shí)驗(yàn)有什么更好的建議或方法?謝謝 |
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易析科技
新蟲(chóng) (職業(yè)作家)
質(zhì)譜首席顧問(wèn)
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這個(gè)二聚體應(yīng)該是電離的時(shí)候產(chǎn)生的二聚體離子2M+H+,可以通過(guò)降低樣品濃度或增加錐孔電壓或增加反吹氣流量,加以抑制。 如果是樣品本身的聚合物,那就需要改變液相分析條件予以分離了 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
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你好,我們是想檢測(cè)高聚體。 1、在液相實(shí)驗(yàn)時(shí)用的流動(dòng)相含有鹽,單體和多聚體能分開(kāi),但是在液質(zhì)實(shí)驗(yàn)換了不含鹽流動(dòng)相時(shí),單體和高聚體分離不開(kāi)。 2、流動(dòng)相為加醋酸銨時(shí),UV圖可以看出高聚體和單體分開(kāi)了,但是相應(yīng)的TIC圖沒(méi)有想要的蛋白質(zhì)譜信號(hào)。 請(qǐng)問(wèn)大俠,能有什么辦法既能將單體和高聚體分離,又能檢測(cè)到相應(yīng)質(zhì)譜信號(hào)? 謝謝! |
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