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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 實驗/技術 » 蛋白酶酶活的測定
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蛋白酶酶活的測定 已有1人參與
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各位大神，本人在做蛋白酶，目前進行到酶活的測定，但用福林試劑法測定的時候遇到一些問題：對照組和實驗組一樣顯藍色，且對照組（即空白組）顏色較深，與實驗組差別不大，具體實驗操作如下：取一支離心管，加入1mL稀釋酶液，置入400C水浴中預熱3~5min，再加入預熱至400C 的2%酪蛋白溶液1mL，準確及時保溫10min。立即加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液，15min后離心分離或用濾紙過濾。吸取1mL清液，加5mL0.4mol/L碳酸鈉溶液，最后加入1mL福林—酚試劑，搖勻，于400C水浴中顯色20min。另取一支離心管為空白管。在空白管中先加入1mL稀釋酶液，再加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液，再加1mL2% 酪蛋白溶液，15min后離心分離或用濾紙過濾。另取一支離心管為空白管。在空白管中先加入1mL稀釋酶液，再加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液，再加1mL2% 酪蛋白溶液，15min后離心分離或用濾紙過濾。 所以，我的問題是空白組為什么會顯色，怎么解決這個問題？ |
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