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[求助]
質(zhì)粒共轉(zhuǎn)化求助 已有1人參與
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| 大家好,我使用pET-28a與pET-22b兩個質(zhì)粒分別攜帶一個目的基因,然后共轉(zhuǎn)化進BL21,雙抗進行篩選。然后一個菌落的菌p我做了兩管,1管是pET-28a通用引物+28a質(zhì)粒上目的基因下游引物,另外1管是pET-22b通用引物+22b質(zhì)粒上目的基因下游引物。都能p出來,但是誘導(dǎo)的時候發(fā)現(xiàn)只有一種蛋白表達(dá),是什么原因呢? |
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不是基因成功連接上表達(dá)載體鑒定完畢后都能表達(dá)的,基因表達(dá)是較復(fù)雜的過程,增大誘導(dǎo)劑量及誘導(dǎo)時間或者更換培養(yǎng)基試試~ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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我們之前是把構(gòu)建好的不同的表達(dá)載體分別轉(zhuǎn)化到表達(dá)菌中,沒有試過不同的表達(dá)載體共同轉(zhuǎn)化到同一種表達(dá)菌株中的情況,你可以做對比實驗看看; 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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