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陽(yáng)光雨露118新蟲 (正式寫手)
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[求助]
蛋白酶酶活的測(cè)定 已有1人參與
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各位大神,本人在做蛋白酶,目前進(jìn)行到酶活的測(cè)定,但用福林試劑法測(cè)定的時(shí)候遇到一些問(wèn)題:對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組一樣顯藍(lán)色,且對(duì)照組(即空白組)顏色較深,與實(shí)驗(yàn)組差別不大,具體實(shí)驗(yàn)操作如下:取一支離心管,加入1mL稀釋酶液,置入400C水浴中預(yù)熱3~5min,再加入預(yù)熱至400C 的2%酪蛋白溶液1mL,準(zhǔn)確及時(shí)保溫10min。立即加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液,15min后離心分離或用濾紙過(guò)濾。吸取1mL清液,加5mL0.4mol/L碳酸鈉溶液,最后加入1mL福林—酚試劑,搖勻,于400C水浴中顯色20min。另取一支離心管為空白管。在空白管中先加入1mL稀釋酶液,再加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液,再加1mL2% 酪蛋白溶液,15min后離心分離或用濾紙過(guò)濾。另取一支離心管為空白管。在空白管中先加入1mL稀釋酶液,再加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液,再加1mL2% 酪蛋白溶液,15min后離心分離或用濾紙過(guò)濾。 所以,我的問(wèn)題是空白組為什么會(huì)顯色,怎么解決這個(gè)問(wèn)題? |
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