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kaixinbobo銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
真核轉(zhuǎn)錄組測序
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| 想要做真菌的有參轉(zhuǎn)錄組測序,已經(jīng)做了該菌基因組的de nove的二三代聯(lián)用測序。但是有點(diǎn)不太明白,轉(zhuǎn)錄組測序平臺使用的是二代測序平臺,那基因組做三代測序有什么意義嗎? |
銅蟲 (初入文壇)
銅蟲 (初入文壇)
銅蟲 (初入文壇)
銅蟲 (初入文壇)
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我覺得你的描述中涉及到兩個不太相關(guān)的問題,不應(yīng)該兩個問題混在一起討論。1)二代+三代基因組測序是一個問題,二三代一起測,可以更好的assemble一個參考基因組。因?yàn)槎鷾y序很準(zhǔn),但由于太短(最長一般也就2*250bp左右),很難解決基因組中的重復(fù)區(qū)域的assemble。三代測序雖然錯誤率比較高,但測序比較長,在assemble過程中可以起到指向標(biāo)的作用,幫助解決重復(fù)區(qū)域拼接的問題。2)轉(zhuǎn)錄組測序可以用二代或三代,但轉(zhuǎn)錄本一般沒有那么長(三代可以到1Mb以上),且三代的錯誤率比較高。因此目前一般用二代測序轉(zhuǎn)錄組。后續(xù)分析可以用常規(guī)流程:表達(dá)量定量、差異表達(dá)基因?qū)ふ、功能富集、網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建等。 |
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