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蛋白酶酶活的測(cè)定 已有1人參與
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各位大神，本人在做蛋白酶，目前進(jìn)行到酶活的測(cè)定，但用福林試劑法測(cè)定的時(shí)候遇到一些問題：對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組一樣顯藍(lán)色，且對(duì)照組（即空白組）顏色較深，與實(shí)驗(yàn)組差別不大，具體實(shí)驗(yàn)操作如下：取一支離心管，加入1mL稀釋酶液，置入400C水浴中預(yù)熱3~5min，再加入預(yù)熱至400C 的2%酪蛋白溶液1mL，準(zhǔn)確及時(shí)保溫10min。立即加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液，15min后離心分離或用濾紙過濾。吸取1mL清液，加5mL0.4mol/L碳酸鈉溶液，最后加入1mL福林—酚試劑，搖勻，于400C水浴中顯色20min。另取一支離心管為空白管。在空白管中先加入1mL稀釋酶液，再加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液，再加1mL2% 酪蛋白溶液，15min后離心分離或用濾紙過濾。另取一支離心管為空白管。在空白管中先加入1mL稀釋酶液，再加入2mL0.4mol/L三氯乙酸溶液，再加1mL2% 酪蛋白溶液，15min后離心分離或用濾紙過濾。 所以，我的問題是空白組為什么會(huì)顯色，怎么解決這個(gè)問題？ |
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