 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 948 | 回復(fù): 5 | ||
| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者出被窩將贈送您 15 個金幣 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
出被窩鐵蟲 (初入文壇)
|
[求助]
原核表達誘導(dǎo)不出來，6月份還能誘導(dǎo)出來，同樣的條件現(xiàn)在誘導(dǎo)不出來了
|
|
|
最近嘗試表達純化真菌的幾丁質(zhì)酶和絲氨酸蛋白酶（1200bp），使用pet28a作為載體、轉(zhuǎn)到bl21(de3)里。6月底和師姐一起連接轉(zhuǎn)化時表達出來蛋白，7月份用碧云天his標(biāo)簽純化試劑盒沒純化出來。9月——11月發(fā)現(xiàn)誘導(dǎo)都誘導(dǎo)不出來了，我還把之前凍存的菌液拿出來也不行，誘導(dǎo)步驟都一樣，重送出去測序也沒問題（生工測序，測出的片段序列和我插入進去的是同一個片段）。我重新連接轉(zhuǎn)化按原步驟重新構(gòu)建了質(zhì)粒，也是測序正確誘導(dǎo)不出來啊啊啊啊啊啊 我誘導(dǎo)條件:37℃ 180r 過夜誘導(dǎo) iptg濃度0.1mM-2mM設(shè)了5個梯度，沒一個出來的 或者我16或25℃誘導(dǎo)試試？ 我接下來要嘗試連32a嗎？ 或者更換感受態(tài)？ 話說是這應(yīng)該質(zhì)粒的問題還是感受態(tài)的問題啊？ 求助各位大神幫忙分析一下原因  6月份的.png 昨天的.png |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
推薦一些20種氨基酸檢測的實際應(yīng)用案例
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有197人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
xn8008
至尊木蟲 (知名作家)
Balance Angel
- 應(yīng)助: 83 (初中生)
- 貴賓: 1.637
- 金幣: 36211.4
- 散金: 828
- 紅花: 45
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 5868
- 在線: 374.9小時
- 蟲號: 987679
- 注冊: 2010-04-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 疫苗學(xué)
出被窩
3樓2023-11-02 15:39:47
烏克蘭跑男
銅蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1588
- 散金: 420
- 帖子: 663
- 在線: 55.1小時
- 蟲號: 29162179
- 注冊: 2022-03-15
- 性別: GG
- 專業(yè): 水產(chǎn)生物免疫學(xué)與病害控制
2樓2023-11-02 13:49:04
出被窩
鐵蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 34.5
- 帖子: 16
- 在線: 9小時
- 蟲號: 26019719
- 注冊: 2021-03-25
- 專業(yè): 獸醫(yī)寄生蟲學(xué)
4樓2023-11-02 16:19:07
天照小星星
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 171.8
- 散金: 100
- 帖子: 295
- 在線: 13.4小時
- 蟲號: 34244256
- 注冊: 2023-11-01
- 專業(yè): 微生物學(xué)
|
1.要換算下對應(yīng)的蛋白分子量 以及載體插入的酶切位點加上載體的表達的氨基酸分子量 2.用非誘導(dǎo)的作為對照 3.注意加抗性培養(yǎng)基篩選目的菌 4.加我qq我來系統(tǒng)指導(dǎo) 5.歡迎找我選購試劑儀器 優(yōu)惠多多 價格可談可開票 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2023-11-04 19:01:11
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 264求調(diào)劑 +8 | 26調(diào)劑 2026-03-03 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 320材料與化工，求調(diào)劑 +6 | 鶴遨予卿 2026-03-04 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 成績276，專業(yè)代碼0856求調(diào)劑 +10 | 小陳朵 2026-03-03 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 281求調(diào)劑 +3 | 我是小小蔥蔥 2026-03-03 | 5/250 |
|
|
|
[考博] 26申博-目前4篇SCI一作 +3 | chen_2024 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +4 | 杰尼龜aaa 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 306求調(diào)劑 +7 | 張張張張oo 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 化工270求調(diào)劑 +10 | 什么名字qwq 2026-03-02 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +6 | 好運連綿不絕 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +5 | 13853210211 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料類考研調(diào)劑 +6 | gemmgemm 2026-03-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 290分材料工程085601求調(diào)劑 數(shù)二英一 +8 | llx0610 2026-03-02 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 306分材料調(diào)劑 +5 | chuanzhu川燭 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料085601調(diào)劑 +5 | 多多子. 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 化工專碩342，一志愿大連理工大學(xué)，求調(diào)劑 +6 | kyf化工 2026-02-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑 +3 | aaadim 2026-03-01 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 313求調(diào)劑 +3 | 水流年lc 2026-02-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +6 | 亭亭亭01 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +3 | 簡木ChuFront 2026-02-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +3 | 52hz~~ 2026-02-28 | 5/250 |
|