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moyunzhi銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
SDS-PAGE電泳法，marker缺最大的兩條帶可能的原因？ 已有1人參與
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最近遇到很神奇的一個(gè)問題： 我在跑SDS-PAGE電泳時(shí)，marker一共8條帶，但時(shí)跑出來時(shí)只有6條帶，最大的兩條帶沒有。 于是我購(gòu)買了 制膠的kit，用kit制膠跑出來的也是6條帶。 然后我就把同一管marker送到別的實(shí)驗(yàn)室?guī)兔σ才芰艘幌拢孥E似乎出現(xiàn)了，別的實(shí)驗(yàn)室就能把 marker的完整條帶都跑出來。 現(xiàn)在是在時(shí)懵的不行。難道時(shí)我人出了問題？ 求各位有經(jīng)驗(yàn)的大佬指點(diǎn)一下。感激！感激！感激！ （小木蟲上傳圖片怎么回事？上傳不了？一上傳就卡死了。給不了圖片啊，傷心，傷心。） |
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moyunzhi
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3樓2022-09-07 08:52:02
小鳥游佑太
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2樓2022-09-06 09:26:31
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【答案】應(yīng)助回帖
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根據(jù)你的描述，如果你不是后來把內(nèi)外槽的buffer液面補(bǔ)充到相同高度，我做一個(gè)猜想，濃縮膠漏液，而分離膠不漏液，這個(gè)說明，漏液?jiǎn)栴}應(yīng)該不是膠板裝夾問題導(dǎo)致的，應(yīng)該是從膠板內(nèi)漏出去的，可能是濃縮膠一開始和玻板之間有縫隙，在之后，凝膠不斷吸水膨脹，使得凝膠與板子貼合更緊密，因此，后面就不漏液了，從這個(gè)猜想去分析大分子蛋白消失的問題，可能是大蛋白在后面因?yàn)槟z和膠板的縫隙跑丟了。 解決方法：為了解決玻璃板和凝膠的縫隙問題，需要注意幾點(diǎn)，1、凝膠配置好需要立即使用，防止凝膠干縮；2、玻璃板需要清洗干凈，不能有任何污漬；3、凝膠的速凝劑比例要選擇合適 |
4樓2022-09-07 11:05:44
moyunzhi
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5樓2022-09-08 21:34:52
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