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藥化小菜雞新蟲 (初入文壇)
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[求助]
藥動(dòng)學(xué)求助
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標(biāo)曲濃度點(diǎn)的確定: 大鼠給藥方案是 將規(guī)格為1mg/ml的藥物,根據(jù)大鼠體重按照5ml/kg進(jìn)行尾靜脈注射給藥(一共三種藥物A,B C),理想狀態(tài)下,一只大鼠最重約300g,給藥量最大=0.3kg*5ml*1mg/ml=1.5mg,大鼠體內(nèi)全部血液視為15ml,即最高血藥濃度為1.5mg/15ml=0.1mg/ml。 根據(jù)藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則,標(biāo)曲的線性范圍應(yīng)該包括5個(gè)半衰期濃度,故標(biāo)曲濃度設(shè)置如下: 0.2mg/ml(200ppm)、0.1mg/ml(100ppm)、0.05 mg/ml(50ppm)、 0.02 mg/ml(20ppm)、0.01 mg/ml(10ppm)、0.005 mg/ml(5ppm)、0.002 mg/ml(2ppm)、0.001 mg/ml(1ppm). 濃度太大,儀器(安捷倫6460)不敢進(jìn)這么大的濃度,因此需要稀釋標(biāo)曲倍數(shù): 稀釋標(biāo)曲100倍: 2ppm, 1ppm, 0.5ppm, 0.2ppm, 0.1ppm, 0.05ppm, 0.02ppm, 0.01ppm 那么血樣我們需要怎么處理才能滿足稀釋100倍呢? 方案一:取10ul樣本血樣,加空白血990ul,得稀釋100倍后的血樣,然后取稀釋后的血樣100ul, 加入A、B、C藥物對(duì)照品溶液各10ul,加入內(nèi)標(biāo)IS 10ul, 再加入乙腈260ul,沉淀蛋白,渦旋3min,再12000r/min 高速離心10min,取上清液進(jìn)樣。 如果按照上述方案進(jìn)行,樣本血樣加空白血稀釋了100倍之后,再加乙腈沉淀蛋白(此處稀釋了4倍),那么樣本的稀釋倍數(shù)是不是變成了400倍? 方案二: 取10ul樣本血樣,加空白血240ul,得稀釋25倍的血樣,然后取上述所得血樣100ul, 加入A、B、C藥物對(duì)照品溶液各10ul,加入內(nèi)標(biāo)IS 10ul, 再加入乙腈260ul,沉淀蛋白,渦旋3min,再12000r/min 高速離心10min,取上清液進(jìn)樣。 如果按照方案二,是血樣用空白血稀釋了25倍,前處理乙腈稀釋了4倍,共100倍 請(qǐng)問(wèn)老師,這兩種稀釋方案哪種可行嗎?如果都不可行,求老師指導(dǎo)!謝謝老師 |
新蟲 (正式寫手)
新蟲 (正式寫手)
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你這個(gè)劑量我估計(jì)血藥濃度頂多0.03mg/ml,稀釋的話不會(huì)用血漿去稀釋的,直接十倍沉淀,再用進(jìn)樣溶液稀釋,滿足靈敏度前提下稀釋越多越好 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (正式寫手)
新蟲 (初入文壇)
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