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Ma丶lone新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助,畢赤酵母系統(tǒng)表達(dá)阿魏酸酯酶,蛋白沒有活性,可能哪些問題,該怎么解決現(xiàn)狀? 已有2人參與
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本人初入分子生物,用PPIZCA質(zhì)粒重組了阿魏酸酯酶的基因序列,然后我把重組質(zhì)粒導(dǎo)入畢赤酵母中。結(jié)果是,PCR和測(cè)序驗(yàn)證基因大小和序列沒問題,western blot也做了能看到所在處清晰的條帶,但是有一次出現(xiàn)了包涵體,這一次沒有,我用這一次的粗酶液和提純的蛋白測(cè)試酶活性,結(jié)果一點(diǎn)活性沒有。請(qǐng)教大佬幫我分析一下可能的原因和解決辦法。 @gyesang @hc-material 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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