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yyoouuyy新蟲 (初入文壇)
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[交流]
好氧甲烷氧化菌分離篩選 已有2人參與
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最近在做甲烷氧化菌篩選分離，采用NMS培養(yǎng)基富集，在富集液中擴增出了甲烷代謝的基因pmoA，但把富集菌液稀釋涂布到平板（除了加瓊脂，其他組分與液體培養(yǎng)基一樣）上，放在真空干燥器里，充入甲烷倒置培養(yǎng)，第二天就長出來很多菌，挑單菌落做不充甲烷，放空氣里的對照，發(fā)現它們也長出來了，但NMS培養(yǎng)基里沒有碳源，不知道它們是怎么長出來的，感覺這個NMS培養(yǎng)基的選擇性好差啊，我看文獻里，好像都是7-14天才長出單菌落，是我等待時間太短嗎？我之前不知道這個培養(yǎng)基的選擇性這么差，調的都是3-4天長出來的單菌落。所以跪求同做甲烷氧化菌篩選的友友們一起探討！ 發(fā)自小木蟲手機客戶端 |
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4樓2025-05-31 00:47:33
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其實我也不太懂，但是我可以提一些建議，首先資料上說目的菌種培養(yǎng)時間約倆星期，結果一兩天就長了，毋庸置疑說明是雜菌污染，可能是好氧異養(yǎng)雜菌，培養(yǎng)基中含有微量有機污染物(可能來自瓊脂)，甲烷充氣，如果不是純甲烷的話(甲烷空氣混合)就會利用氧氣與微量污染物生長，氮氣填充不生長估計是氮氣很純，氧氣含量幾乎為零，氧氣填充不生長可能是某些有機物在強氧化環(huán)境中被分解，或者是再次培養(yǎng)時有機污染物含量相較于之前的含量少了所以不長，可以試一下更換更純凈的瓊脂凝固劑，排除有機污染物的影響… 發(fā)自小木蟲手機客戶端 |
7樓2025-06-02 11:25:44
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8樓2025-06-04 19:01:23
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9樓2025-06-04 19:01:53
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應該是可以的，記得氧氣大約百分之十幾就行，具體的我也不太清楚。雜菌污染問題解決了嗎？如果是那種干燥的蔓延菌落的話可能是芽孢桿菌屬污染了，培養(yǎng)基有有機污染物的話就可能生長，可以換更純凈的瓊脂來培養(yǎng)，試試看行不行吧 發(fā)自小木蟲手機客戶端 |
10樓2025-06-06 00:12:04
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