 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1669 | 回復(fù): 2 | |||
[交流]
多肽標(biāo)記和修飾 已有2人參與
|
|
目前多肽合成定制中，多肽標(biāo)記及多肽修飾的內(nèi)容非常多，常用的有N 端標(biāo)記或修飾、N 端熒光素修飾、光敏劑修飾、N 端脂肪酸修飾、C 端標(biāo)記或修飾、磷酸化標(biāo)記、二硫鍵成環(huán)環(huán)化、賴氨酸修飾、高氨基酸修飾、PEG修飾、單標(biāo)、雙標(biāo)、疊氮修飾、Mal修飾、N-Me修飾、偶聯(lián)等。廣泛應(yīng)用在多肽合成藥物、多肽生物學(xué)、多肽抗體以及多肽合成試劑的研究中。目前應(yīng)用廣泛的有：非放射性核素標(biāo)記（C13，H2，N15），熒光標(biāo)記（FAM，F(xiàn)ITC等），生物素標(biāo)記，磷酸化修飾等。 1. 多肽非放射性核素標(biāo)記 目前在多肽非放射性核素標(biāo)記中，使用廣泛的仍然是C13，N14，因?yàn)槠涫褂冒踩�，放射性小�，F(xiàn)在有比較完全的非放射性標(biāo)記的氨基酸，可以按照正常的多肽合成方法將標(biāo)記好的氨基酸直接連接到多肽上。 2. 多肽熒光標(biāo)記 多肽熒光標(biāo)記由于沒有放射性，實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單。因此，目前在生物學(xué)研究中多肽熒光標(biāo)記應(yīng)用非常廣泛，多肽熒光標(biāo)記方法與熒光試劑的結(jié)構(gòu)有關(guān)系，對(duì)于有游離羧基的采用的方法與接多肽反應(yīng)相同，也采用HBTU/HOBt/DIEA方法連接。 在N端標(biāo)記FITC的多肽需經(jīng)歷環(huán)化作用來形成熒光素，通常會(huì)伴有最后一個(gè)氨基酸的去除，但當(dāng)有一個(gè)間隔器如氨基己酸，或者是通過非酸性環(huán)境將目的多肽從樹脂上切下來時(shí)，這種情況可避免在切割的過程中被TFA切割掉。 3. 多肽生物素標(biāo)記 生物素-親合素系統(tǒng) (biotin-avidin system，BAS)，是70年代后期應(yīng)用于免疫學(xué)，并得到迅速發(fā)展的一種新型生物反應(yīng)放大系統(tǒng)。由于它具有生物素與親合素之間高度親和力及多級(jí)放大效應(yīng)，并與熒光素、酶、同位素等免疫標(biāo)記技術(shù)有機(jī)地結(jié)合，使各種示蹤免疫分析的特異性和靈敏度進(jìn)一步提高。主要有用于標(biāo)記多肽氨基的生物素N-羥基丁二酰亞胺酯(BNHS)和生物素對(duì)硝基酚酯(pBNP)，其中以BNHS最常用，當(dāng)然，也可以直接使用生物素也可以標(biāo)記，因?yàn)槠浣Y(jié)構(gòu)上有個(gè)游離的羧基，采用HBTU/HOBt/DIEA方法縮合，由于生物素的溶解度低，使用DMSO/DMF的混合溶劑增加溶解度。 4. 磷酸肽多肽合成 磷酸肽在生命過程中發(fā)揮重要作用，磷酸化的位置在多肽上的Ser，Thr，Tyr。目前磷酸肽合成一般都采用磷酸化氨基酸，目前使用的都是單芐基磷酸化氨基酸。磷酸化氨基酸的連接一般采用HBTU/HOBt/DIEA方法，但是目前采用該方法合成磷酸化多肽也有缺點(diǎn)，特別是在合成多磷酸化多肽或氨基酸較長的多肽的時(shí)候，連接效率低，最后產(chǎn)品純度很低，對(duì)于這種磷酸化多肽，我們考慮采用后磷酸化方法，其合成過程就是在多肽合成結(jié)束后，選擇性脫去要標(biāo)記的氨基酸的側(cè)鏈保護(hù)基，對(duì)于Tyr，Thr可以直接使用側(cè)鏈不保護(hù)的氨基酸進(jìn)行反應(yīng)，而Ser可以采用Fmoc-Ser（trt），在1% TFA/DCM條件下可以定量的脫除。后磷酸化，采用雙芐基亞磷酰胺，四氮唑生成亞磷酰胺四唑活性中間體，連接到羥基上，隨后在過氧酸下氧化生成磷�；�，完成反應(yīng)。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
歡迎211本科同學(xué)，過A區(qū)國家線，A區(qū)非偏遠(yuǎn)一本，交叉學(xué)科課題組
已經(jīng)有11人回復(fù)
-
成果系統(tǒng)訪問量大，請(qǐng)15分鐘后再嘗試。由此給您造成的不便，敬請(qǐng)諒解。
已經(jīng)有14人回復(fù)
-
281電子信息求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
材料277分求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
求調(diào)劑院校
已經(jīng)有12人回復(fù)
-
293求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
化學(xué) 0703求調(diào)劑 總分293 一志愿211
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
320材料一志愿西工大專碩英二數(shù)二 有兩年光伏工作經(jīng)驗(yàn)
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
材料328求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
304分材料專碩求調(diào)劑
已經(jīng)有12人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
bambio
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 173.2
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 163
- 在線: 16.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 28363125
- 注冊(cè): 2022-02-16
- 專業(yè): 化學(xué)生物學(xué)與生物有機(jī)化學(xué)
2樓2022-03-03 13:15:06
okil2
鐵蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 16.5
- 帖子: 2
- 在線: 10.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 28234734
- 注冊(cè): 2022-01-26
- 性別: GG
3樓2023-08-31 16:53:01
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 cctv1044 的主題更新
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 歡迎211本科同學(xué)，過A區(qū)國家線，A區(qū)非偏遠(yuǎn)一本，交叉學(xué)科課題組 +7 | lisimayy 2026-03-04 | 11/550 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 281電子信息求調(diào)劑 +4 | jhtfeybgj 2026-03-02 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑院校 +6 | 云朵452 2026-03-02 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 一志愿985材料與化工 326分求調(diào)劑 +3 | Hz795795 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 070300調(diào)劑一志愿南京大學(xué)化學(xué)專業(yè)，初試273分，有論文有專利有競(jìng)賽，求調(diào)劑B區(qū)211 +3 | 82206202 2026-02-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué) 一志愿東北大學(xué) 279分求調(diào)劑 +4 | 聶樂平 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 本科太原理工采礦工程，求調(diào)劑 +3 | onlx 2026-03-01 | 3/150 |
|
|
|
[論文投稿]
 主編終審卡者不動(dòng)
 100+3
|
Stray2021 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿西交大材料學(xué)碩 346 求調(diào)劑 +3 | zju51 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +3 | 咕嚕咕嚕123123 2026-03-02 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0854總分272 +5 | 打小就是老實(shí)人 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +4 | 杰尼龜aaa 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +3 | MuoLuo1312 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 11408，學(xué)碩276求調(diào)劑 +3 | 崔wj 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑一志愿東北林業(yè)大學(xué)材料與化工英二數(shù)二 +5 | 蟲蟲蟲蟲蟲7 2026-03-01 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0856化工專碩求調(diào)劑 +15 | 董boxing 2026-03-01 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 一志愿鄭大材料學(xué)碩298分，求調(diào)劑 +6 | wsl111 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 化工專碩342，一志愿大連理工大學(xué)，求調(diào)劑 +6 | kyf化工 2026-02-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 313求調(diào)劑 +3 | 水流年lc 2026-02-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | 曼殊2266 2026-02-28 | 7/350 |
|