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hyy3429新蟲 (初入文壇)
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[交流]
VEGFR-2 western求助! 已有1人參與
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最近一個多月一直在跑huvec的vegfr-2蛋白,嘗試了很多條件,但是在230kda目標(biāo)區(qū)域一直沒有信號較強(qiáng)的目標(biāo)蛋白出現(xiàn),總是在75-100之間有明顯條帶,請問大家有跑過這個蛋白的嗎~以下是我的跑蛋白條件: sds-page,8% ,4-12%預(yù)制膠,4-20%都試過,sds-page時間 100V 90min 轉(zhuǎn)膜為濕轉(zhuǎn),嘗試過220mA 160min,240mA 150min,70V 150min,250 mA 120min 轉(zhuǎn)膜液甲醇濃度20%,10%,5%都試過 封閉液嘗試過碧云天,5%bsa,5%脫脂奶粉 一抗試過proteintech、CST,4度過夜 二抗室溫2小時,ECL顯影 請問問題出在哪里呢?很多文獻(xiàn)中用的是原代huvec細(xì)胞,我用的是可以一直傳代的huvec,是這個原因嗎? 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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這是VEGFR-2抗體的sci報道綜述,你可以直接查你買的抗體貨號,點擊第一列貨號可以查看相應(yīng)的sci報道文獻(xiàn),建議參考文獻(xiàn)中的實驗條件和結(jié)果。 https://www.labome.com/review/gene/human/VEGFR-2-antibody.html |
新蟲 (初入文壇)
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