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ap372767129

鐵蟲 (正式寫手)

[求助] 一種熱穩(wěn)定性高的酶,熱保溫后酶活力提高現(xiàn)象正常嗎? 已有2人參與

各位老師好,
      我現(xiàn)在在做一種淀粉酶,在測熱穩(wěn)定性時,發(fā)現(xiàn)這種酶在室溫放置1 h、50℃、60℃和70℃保溫1 h或更長時間,然后在70℃溫度下(最適反應溫度)測酶活發(fā)現(xiàn)保溫后的酶都比常溫下放置酶的酶活高,并且保溫時間越長,酶活力呈現(xiàn)升高趨勢,酶活可提高200%以上。請問這種淀粉酶的酶活力變化現(xiàn)象是正常的嗎,是否有類似的很多酶都是這種現(xiàn)象?大部分酶的活力我發(fā)現(xiàn)都是隨著保溫時間延長,活力下降的。
           
          謝謝!
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fuyuandj86

版主 (著名寫手)

己所不欲,勿施于人

【答案】應助回帖

感謝參與,應助指數(shù) +1
酶是從冷凍的母液里解凍的還是干粉配的?如果是干粉的話可能是因為沒有完全溶解。
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2樓2020-12-22 12:03:38
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pennchem

專家顧問 (正式寫手)

【答案】應助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與,應助指數(shù) +1
ap372767129(fuyuandj86代發(fā)): 金幣+10 2020-12-30 14:32:31
(1)有沒有可能酶里面有抑制劑,但是加熱能讓抑制劑滅活?
(2)酶里面有水解酶,加熱讓水解酶失活?
(3)酶原在加熱后轉變成有活性的酶?
行至水窮處,坐看云起時
3樓2020-12-22 13:06:21
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ap372767129

鐵蟲 (正式寫手)

引用回帖:
2樓: Originally posted by fuyuandj86 at 2020-12-22 12:03:38
酶是從冷凍的母液里解凍的還是干粉配的?如果是干粉的話可能是因為沒有完全溶解。

謝謝您的回復,我的酶是異源表達后純化得到的純酶液,是液態(tài)的
4樓2020-12-22 14:03:10
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ap372767129

鐵蟲 (正式寫手)

引用回帖:
3樓: Originally posted by pennchem at 2020-12-22 13:06:21
(1)有沒有可能酶里面有抑制劑,但是加熱能讓抑制劑滅活?
(2)酶里面有水解酶,加熱讓水解酶失活?
(3)酶原在加熱后轉變成有活性的酶?

謝謝老師您的回復,我的酶是異源表達后純化得到的純酶液,緩沖體系是Tris-HCl,應該是沒有抑制劑的。有可能是加熱后酶的活力被激活,我想知道這種加熱保溫后能夠被激活的現(xiàn)象是一種常見的現(xiàn)象嗎?
5樓2020-12-22 14:06:42
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pennchem

專家顧問 (正式寫手)

【答案】應助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
ap372767129(fuyuandj86代發(fā)): 金幣+10 2020-12-30 14:32:11
引用回帖:
5樓: Originally posted by ap372767129 at 2020-12-22 14:06:42
謝謝老師您的回復,我的酶是異源表達后純化得到的純酶液,緩沖體系是Tris-HCl,應該是沒有抑制劑的。有可能是加熱后酶的活力被激活,我想知道這種加熱保溫后能夠被激活的現(xiàn)象是一種常見的現(xiàn)象嗎?...

不常見。一般而言,加熱會讓蛋白酶失活。即使是耐熱的酶,加熱后有部分蛋白失活,活性變低。(高溫下,分子運動加劇,導致部分蛋白變性)

加熱后,活性更高,不是活力被激活,活性更高(hyperactive)可能更確切一些。和這個類似的例子有,熱啟動Taq酶,加熱后,修飾或抗體失活,有活性的酶釋放出來,表現(xiàn)就是加熱酶的活性出來了。
行至水窮處,坐看云起時
6樓2020-12-23 09:18:54
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上岸君ing

新蟲 (初入文壇)

您好,請問這個酶的情況您后面做原因分析了嗎?我現(xiàn)在也遇到了類似情況,熱穩(wěn)定性數(shù)據看起來就很奇怪
發(fā)自小木蟲手機客戶端
7樓2025-04-16 12:24:40
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pennchem

專家顧問 (正式寫手)

引用回帖:
7樓: Originally posted by 上岸君ing at 2025-04-16 12:24:40
您好,請問這個酶的情況您后面做原因分析了嗎?我現(xiàn)在也遇到了類似情況,熱穩(wěn)定性數(shù)據看起來就很奇怪

方便提供反應的具體情況(實驗方式,對比數(shù)據)嗎? 我想理解一下這種情況發(fā)生的原因。 可以隱藏酶和底物信息,但是反應條件和操作細節(jié)盡量提供吧。
行至水窮處,坐看云起時
8樓2025-04-16 16:37:07
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