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木冰衿→_→新蟲 (正式寫手)
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[求助]
衡量催化能力的話,請問酶活和比酶活我應該看哪個指標呢? 已有2人參與
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最近在全物種找催化能力最強的某種酶,想大腸桿菌表達出酶做催化,但是不知道應該看哪個指標才能衡量催化能力。 1. 得到的指導是說看SPECIFIC ACTIVITY 也就是比活,但是我查了下比活是衡量純度的指標,用在這里是否不妥? 2. 因為我催化想用粗酶液,而查到的文獻大多用純化后的酶測量的數據,所以提純過和沒提純過的酶的比活是否不同?文獻的數據是否有參考意義? 3. 如果不能用比活,那么我應該查找什么指標衡量酶的催化能力?@hc-material |
木蟲 (著名寫手)
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如果是作為酶催化能力的體現,當然是要選擇酶活來衡量,包括在實際的工業(yè)生產應用中,計算酶使用量的時候,一般都是催化一定量的底物,需要多少酶活來計算,不會使用比活力。 也如你所講,比活在某種意義上就是一個純度的體現,即每單位酶產品所具有的酶活,打個比方,一個反應需要1000U的酶,你用比活力低的粗酶液,可能需要加入10g的量才能達到酶活總量(比活是100U/g),而如果使用比活較高的純化后蛋白,純度高,單位質量含有的酶蛋白量要比粗酶液高,可能加個1g就可以了(比活是1000U/g)。 而目前工業(yè)酶的使用中,很少使用純化后的蛋白,成本太高,絕大多數還是使用粗酶液或者粗酶粉,你看的文獻都是科研院所實驗室進行科學研究的成果,他們不考慮成本的,可以使用昂貴的純化填料以及設備等等,為的是獲得一個準確的理論研究數據,比活越高證明他們獲得的產品純度或者含量越高。但實際應用中,還是需要考慮各種實際成本(附加值高的產品除外)。 |

新蟲 (正式寫手)
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最關鍵的是看Km值,不是比活,我是生產酶的工廠:只要酶有活性就是有酶活,就不用檢測這個指標了,除非你生產的沒有活性~比活是酶純度的意思:1mg廣義上的酶(凍干酶里面有緩沖鹽份),有多少酶單位;對于底物確定的酶,酶的質量若要好看Km:達到最大反應速度一半時底物的濃度 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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最關鍵的是看Km值,不是比活,我是生產酶的工廠:只要酶有活性就是有酶活,就不用檢測這個指標了,除非你生產的沒有活性~比活是酶純度的意思:1mg廣義上的酶(凍干酶里面有緩沖鹽份),有多少酶單位;對于底物確定的酶,酶的質量若要好看Km:達到最大反應速度一半時底物的濃度 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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剛錄用,沒有期刊號,但是在線可看的論文可以放為代表作嗎
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