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大腸桿菌高密度發(fā)酵溶氧控制
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請(qǐng)問(wèn)大家做大腸桿菌工業(yè)發(fā)酵時(shí)，一定要控制溶氧在一定水平以上嗎？一般罐上培養(yǎng)前幾個(gè)小時(shí) 因?yàn)榫w密度比較低，一般還有溶氧顯示，可是長(zhǎng)到OD600＝10左右，受限于通氣量和攪拌就不會(huì)有溶氧顯示了。 那么發(fā)酵全程要求有溶氧顯示是怎么實(shí)現(xiàn)的呢？只是簡(jiǎn)單的提高通氣、攪拌？還是要通過(guò)精準(zhǔn)的控制碳源或者氮源流加來(lái)實(shí)現(xiàn)？ 另外想請(qǐng)教一下，大腸桿菌高密度發(fā)酵實(shí)現(xiàn)的關(guān)鍵是什么？微量元素？通氣量？還是什么？先謝謝大家！期待…… 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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4樓2019-02-13 22:14:47
送紅花一朵 |
多謝！請(qǐng)問(wèn)有沒(méi)有做過(guò)高密度的發(fā)酵？通氣量要到多少vvm才可以，1vvm是不是有點(diǎn)低？另外高密度發(fā)酵是不是一定要流加微量元素呢？  發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
5樓2019-02-14 12:00:57
6樓2019-03-04 11:35:43
7樓2019-03-06 23:13:14
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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請(qǐng)問(wèn)各位 小弟最近在做高密度發(fā)酵，因?yàn)橹皩?shí)驗(yàn)室都沒(méi)做過(guò)，所以在摸索階段。目前遇到的問(wèn)題是菌體濃度上不去，OD600最大只能到30~40左右。 5L發(fā)酵罐，培養(yǎng)基主要成分：20g/L酵母浸粉，5g/L葡萄糖，10g/L NaCl, 15g/L磷酸氫二鉀，5g/L磷酸二氫鉀 通壓縮空氣 菌種：BL21(DE3)，做重組蛋白表達(dá)（無(wú)毒） 補(bǔ)料：葡萄糖，pH反饋補(bǔ)料 37℃培養(yǎng)6h左右初糖耗盡，這時(shí)候轉(zhuǎn)速達(dá)到1000rpm，通氣量3vvm，溶氧只有20%左右，OD600只有15左右，后面接著補(bǔ)料，OD600達(dá)到25左右就長(zhǎng)不上去了，溶氧也只有2%，此時(shí)降溫到28度誘導(dǎo)，最終也只漲到35左右。 請(qǐng)教各位大神如何改進(jìn)實(shí)現(xiàn)高密度��？看別人都可以做到OD600在100以上的。。。 |
8樓2019-05-22 10:19:47
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你的培養(yǎng)周期現(xiàn)在是多少？建議試試溶氧反饋補(bǔ)料，pH反饋沒(méi)法實(shí)現(xiàn)溶氧顯示的問(wèn)題，最近也在試5L罐 28h能長(zhǎng)到50左右了，共同學(xué)習(xí)  發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
9樓2019-05-30 01:58:18
10樓2021-08-11 13:59:38
簡(jiǎn)單回復(fù)
time882樓
2019-02-10 21:12
回復(fù)
14026sun(金幣+5): 謝謝參與
14026sun3樓
2019-02-11 10:18
回復(fù)
額。。。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端
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