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Limax-Tang新蟲 (正式寫手)
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[求助]
同源重組(無縫克隆)做不出來，求解決/改進(jìn)方案。 已有2人參與
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在上海華東理工的實(shí)驗(yàn)室做同源重組效果很好，基本都比較容易的能挑出陽性克隆;但同樣的實(shí)驗(yàn)在杭州浙江工業(yè)大學(xué)的實(shí)驗(yàn)室做卻結(jié)果很差，不知道有沒有經(jīng)歷過類似情況的同志提出寶貴的建議！萬分感激！希望大家能多多交流~ 另外重組酶是上海翊圣的。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
Limax-Tang: 金幣+10, ★★★很有幫助 2019-07-15 08:47:33
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
Limax-Tang: 金幣+10, ★★★很有幫助 2019-07-15 08:47:33
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同樣的經(jīng)歷對于搞科研都應(yīng)該遇見不少，不過樓主之前已有成功經(jīng)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)流程上應(yīng)該沒有大的問題，可能要細(xì)細(xì)擼一遍實(shí)驗(yàn)流程才能找到問題，我之前也經(jīng)常做同源重組，SLIC，Gibson組裝都試過，公司的kit也用過不少，遇見不成功的最可能的問題就是擴(kuò)的不好或者同源臂有問題，仔細(xì)檢查下沒有問題的話，可以考慮先買公司的kit做，安利genscript的genbuilder還可以，畢竟實(shí)驗(yàn)不等人，原因可以慢慢找。祝好。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2019-07-04 12:46:27
wshdhr8
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3樓2019-07-04 13:03:06
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4樓2019-08-06 15:51:15
學(xué)而不思則惘
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我們實(shí)驗(yàn)室之前用的也是圣羽的，用著用著就做不出來了，后來換了諾唯贊的就好了，我構(gòu)建到了9200bp片段+5000的pcdna3.1，但是現(xiàn)在最近一個(gè)月，我用諾唯贊死活做不出來。。。。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2019-08-14 22:42:27
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