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實驗技術(shù)及原理指南
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實驗技術(shù)及原理指南 需要的可見附件 目 錄 一、DNA實驗技術(shù) 1 01、動物基因組DNA的提取 1 02、質(zhì)粒DNA的提取 2 03、DNA的瓊脂糖凝膠電泳 9 04、重組質(zhì)粒的連接、轉(zhuǎn)化及篩選 12 05、cDNA文庫構(gòu)建 15 06、變性梯度凝膠電泳 19 07、Southern Blot原理及實驗方法 20 08、基因定點突變 23 09、凝膠遷移實驗（EMSA） 26 10、SSR分子標記實驗操作及其注意事項 30 11、單核苷酸多態(tài)性（SNP）實驗 33 12、染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP） 35 13、DNA亞硫酸氫鹽修飾和純化操作步驟（甲基化） 38 二、RNA實驗技術(shù) 41 14、Trizol法提取總RNA 41 15、RNA的瓊脂糖凝膠電泳實驗原理和步驟 42 16、mRNA的分離純化 44 17、RNA干擾實驗 47 18、Northern Blot原理及實驗方法 51 19、原位雜交實驗 54 20、熒光原位雜交實驗（FISH） 56 21、siRNA表達載體的構(gòu)建 59 22、石蠟切片制作(蘇木精-伊紅對染法) 62 三、PCR實驗技術(shù) 67 23、普通PCR、原位PCR、反向PCR和反轉(zhuǎn)錄PCR基本原理和操作步驟 67 24、逆轉(zhuǎn)錄PCR 73 25、聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR） 74 26、菌落PCR 76 27、降落PCR 77 28、逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR) 78 29、實時熒光定量PCR具體實驗步驟 80 30、目的基因PCR擴增產(chǎn)物的克隆 84 31、PCR產(chǎn)物的TA克隆 (DNA的膠回收和連接) 86 32、原位PCR技術(shù)基本原理、類型、步驟和應(yīng)用 89 33、熒光原位雜交 93 34、重疊延伸PCR實驗 95 35、AFLP原理和操作步驟 96 36、限制性片段長度多態(tài)性(RFLP) 98 37、ddRT-PCR(差示反轉(zhuǎn)錄PCR,又mRNA差別顯示技術(shù)) 99 38、PCR-SSCP實驗步驟 102 四、蛋白質(zhì)實驗技術(shù) 107 39、SDS-PAGE蛋白質(zhì)樣品的制備 107 40、蛋白質(zhì)含量測定法 107 41、蛋白質(zhì)的表達、分離、純化實驗 115 42、Western blot 詳細操作步驟 117 43、免疫組化操作步驟 123 44、免疫共沉淀Co-IP實驗操作步驟 133 45、等電聚焦電泳法測定蛋白質(zhì)的等電點 134 46、雙向電泳操作步驟及相關(guān)試劑配制 138 47、ELISA步驟、試劑及注意事項 142 48、病毒感染細胞實驗整體流程及原理 144 五、感受態(tài)細胞的制備及其轉(zhuǎn)化技術(shù) 149 49、大腸桿菌感受態(tài)細胞制備實驗（CaCl2法） 149 50、農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞的制備 150 51、畢氏酵母（Pichia pastoris）感受態(tài)細胞制備及轉(zhuǎn)化 153 52、大腸桿菌轉(zhuǎn)化實驗（熱擊法） 156 53、IPTG誘導(dǎo)蛋白表達的原理及方法步驟 157 54、質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌 158 55、細胞轉(zhuǎn)染操作方法 160 56、真核細胞轉(zhuǎn)染操作方法 162 六、細胞實驗技術(shù) 165 57、原代細胞培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的方法 165 58、細胞原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)、凍存和復(fù)蘇 166 59、原代細胞的培養(yǎng)與建系 168 60、細胞周期測定實驗 178 61、細胞凋亡檢測，細胞凋亡實驗步驟，檢測方法 181 62、細胞凋亡檢測實驗（Annexin V/PI雙染色法） 193 63、細胞增殖檢測：MTT法 194 64、MTT法測定細胞相對數(shù)和相對活力 197 65、抗腫瘤藥物5-氟尿嘧啶對腫瘤細胞遷移的影響（細胞劃痕法） 198 66、Transwell實驗方法 204 67、TUNEL法檢測細胞凋亡實驗原理和方法 214 |
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[考研] 278求調(diào)劑 +5 | Gale1314 2026-03-06 | 5/250 |
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[教師之家] 售SCI一區(qū)T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齊全,可+急 +3 | 7mzg0e04z2 2026-03-06 | 5/250 |
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[考研] 售瀆SCI文章，我:8⊙ 55 1⊙ 54。備注【⊙=0】 +3 | vs9ky3szrj 2026-03-06 | 3/150 |
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[考研] 0307化學(xué)求調(diào)劑 +4 | 0ok0k 2026-03-07 | 4/200 |
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[考研]
 085600材料與化工 292分 求調(diào)劑
+6
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程晴之 2026-03-06 | 6/300 |
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[考研] 085701環(huán)境工程295求調(diào)劑，一志愿A區(qū)211 +7 | 等春來， 2026-03-06 | 8/400 |
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[考研] 初試297求調(diào)劑 +3 | 一個蘿蘿 2026-02-28 | 3/150 |
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[考研] 材料與化工328求調(diào)劑 +4 | 。，。，。，。i 2026-03-02 | 4/200 |
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[考研] 材料與化工354調(diào)劑 +4 | Lucy-xiao 2026-03-06 | 7/350 |
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[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +5 | 呼呼？~+123456 2026-03-05 | 5/250 |
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[考研] 290求調(diào)劑 +5 | Bananaiy 2026-03-04 | 5/250 |
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[基金申請]
本子寫完了，給DS兄弟看了，得了92分
+6
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Doma 2026-03-01 | 10/500 |
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[考研] 304求調(diào)劑 +3 | 曼殊2266 2026-03-04 | 3/150 |
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[考研] 085701環(huán)境工程 求調(diào)劑 +7 | xiiiia 2026-03-04 | 7/350 |
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[考研] 320材料一志愿西工大專碩英二數(shù)二 有兩年光伏工作經(jīng)驗 +5 | 錘某人 2026-03-04 | 8/400 |
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[考研]
一志愿中南大學(xué)理學(xué)化學(xué)
+6
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15779376950 2026-03-01 | 8/400 |
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[考研] 一志愿314求調(diào)劑 +7 | 202111120625 2026-03-03 | 7/350 |
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[考博] 26申博 +5 | north， 2026-02-28 | 5/250 |
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[考研] 江蘇省農(nóng)科院招調(diào)劑1名 +5 | Qwertyuop 2026-03-01 | 5/250 |
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[考研] 化工335求調(diào)劑 +5 | 摸摸貓貓頭 2026-03-02 | 5/250 |
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