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豆子喔

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GFP必須轉(zhuǎn)入的是基因的CDS區(qū)嗎可以加入U(xiǎn)TR區(qū)嗎起始密碼子附近GC含量高無(wú)法設(shè)置引物可以增加3的倍數(shù)的UTR區(qū)嗎

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1樓 2020-08-18 08:47:21

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zxd95

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一般都是GFP融合在基因cds區(qū)的N端或C端，GC含量對(duì)PCR擴(kuò)增影響不大。

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5樓2020-08-18 08:52:02

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豆子喔

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引用回帖:

5樓: Originally posted by zxd95 at 2020-08-18 08:52:02
一般都是GFP融合在基因cds區(qū)的N端或C端，GC含量對(duì)PCR擴(kuò)增影響不大。

主要是起始密碼子10個(gè)堿基 tm就有8、90度無(wú)法擴(kuò)增產(chǎn)物

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6樓2020-08-18 08:53:31

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zxd95

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6樓: Originally posted by 豆子喔 at 2020-08-18 08:53:31
主要是起始密碼子10個(gè)堿基 tm就有8、90度無(wú)法擴(kuò)增產(chǎn)物
...

可以做pcr的，變性溫度一般是94度，現(xiàn)在有的快速聚合酶是98度，肯定能夠解開(kāi)鏈的GC含量高，正向引物可以短一些。

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14樓2020-08-19 03:47:55

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sct7310樓

2020-08-18 09:20 回復(fù)

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herethere7樓

2020-08-18 08:59 回復(fù)

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zxd954樓

2020-08-18 08:49 回復(fù)

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tzynew12樓

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rohdy3樓

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yuying042113樓

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abc8765244082樓

2020-08-18 08:47 回復(fù)

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南京百奧李勇8樓

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我是觸手怪9樓

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bjxhljsw11樓

2020-08-18 09:52 回復(fù)

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