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凳子大帝新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
Topo l 酶作用的DNA松弛實(shí)驗(yàn) 已有1人參與
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求助 做DNA松弛實(shí)驗(yàn)，為了研究藥物的拓?fù)洚悩?gòu)酶I的抑制作用。 跑了好幾次膠，永遠(yuǎn)都是一條帶。DNA 和 DNA+TOPO I 都跑不開(kāi)，是不是我買的DNA有問(wèn)題？ 買的pBR322 DNA,說(shuō)明書(shū)里沒(méi)有寫(xiě)明是否是超螺旋的，是否這個(gè)實(shí)驗(yàn)的DNA需要自己提？？？ 所有步驟都按照文獻(xiàn)做了，可是結(jié)果都沒(méi)有。求助做過(guò)的大神能告知一下細(xì)節(jié)~！不勝感激~！ 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
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pennchem
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
凳子大帝: 金幣+10, ★★★很有幫助 2020-06-09 11:53:36
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
凳子大帝: 金幣+10, ★★★很有幫助 2020-06-09 11:53:36
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（如果是堿裂解-柱提取法）提取時(shí)候堿裂解過(guò)一點(diǎn)，吸取時(shí)候速度快一點(diǎn)，都容易產(chǎn)生nick導(dǎo)致解螺旋，得到松弛DNA。即使超螺旋DNA，保存，凍融過(guò)程都可能導(dǎo)致產(chǎn)生nick而解螺旋。 一般提取后電泳一般得到2-3條帶（對(duì)應(yīng)超螺旋，松弛，線性DNA）。 |
4樓2020-06-08 20:20:48
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自己提質(zhì)粒來(lái)測(cè)試，這個(gè)實(shí)驗(yàn)很簡(jiǎn)單的，電泳結(jié)果很明顯。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
3樓2020-06-08 20:07:28
凳子大帝
新蟲(chóng) (小有名氣)
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所以這個(gè)實(shí)驗(yàn)必須要自己提DNA嘛？買來(lái)的dna是不是多數(shù)變?yōu)榱私獬菪?br /> 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
5樓2020-06-09 02:58:15
凳子大帝
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6樓2020-06-09 02:59:25
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