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加油劉小葵新蟲 (初入文壇)
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熒光多肽親和力的測(cè)定可以用熒光酶標(biāo)儀測(cè)熒光強(qiáng)度來實(shí)現(xiàn)嗎
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如題,我們的目標(biāo)是將熒光基團(tuán)連接在多肽上,做一個(gè)熒光成像的探針。文獻(xiàn)里大多數(shù)測(cè)定親和力的方法都是用一個(gè)帶有125I放射性物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)競(jìng)爭(zhēng)配體,或者是做成爬片用激光共聚焦顯微鏡拍照后用image j統(tǒng)計(jì)熒光強(qiáng)度。因?yàn)槲蚁胗?6孔板做,所以能不能將實(shí)驗(yàn)設(shè)置成這樣呢: 預(yù)實(shí)驗(yàn)得出與細(xì)胞膜上抗原結(jié)合熒光強(qiáng)度最大的熒光探針濃度,用此濃度的探針與不同濃度的競(jìng)爭(zhēng)性配體在鋪好細(xì)胞的96孔板里共孵育,洗3次后用熒光酶標(biāo)儀測(cè)每個(gè)孔的熒光強(qiáng)度,由此求最大半抑制濃度。 這個(gè)方法可行嗎,我目前沒有搜到這個(gè)方法的文獻(xiàn),求各位大神指導(dǎo)! |
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