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求助，sgRNA引物設(shè)計(jì)時(shí)，為什么BsaI的酶切位點(diǎn)為GGCA和AAAC? 已有2人參與
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求助，bsai的酶切位點(diǎn)為 5’.....ggtctc（n）1.....3‘ 3’.....ccagag（n）5......5‘ 為什么在設(shè)計(jì)sgrna時(shí)，正向引物的5’端加入的堿基是ggca，反向引物的5’端加入的是aaac? |
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3樓2022-07-16 18:55:34
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
一粒種子: 金幣+10, 原來是與載體的結(jié)構(gòu)序列有關(guān)，非常感謝您！ 2022-07-19 15:39:15
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
一粒種子: 金幣+10, 原來是與載體的結(jié)構(gòu)序列有關(guān)，非常感謝您！ 2022-07-19 15:39:15
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BsaI酶的識(shí)別位點(diǎn)，和剪切位點(diǎn)是不同的。 5’.....ggtctc（n）1.....3‘ 3’.....ccagag（n）5......5‘ ggtctc是識(shí)別位點(diǎn)，然后+1后才會(huì)切，后面的序列可以隨便是什么。而當(dāng)時(shí)這個(gè)載體的發(fā)明人，就恰好設(shè)計(jì)成ggca。 另一端為什么是AAAC呢？一位還有第二個(gè)BsaI酶的位點(diǎn)，載體的發(fā)明人第二個(gè)切的地方設(shè)計(jì)成AAAC。 你仔細(xì)把序列看一下，就會(huì)明白 |
2樓2022-07-16 13:46:52
4樓2022-07-19 15:40:01
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