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段伏yyh新蟲 (初入文壇)
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[求助]
大片段基因擴(kuò)增不出來,求助 已有3人參與
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課題需要做呼腸孤病毒反向遺傳操作系統(tǒng),擴(kuò)增片段擴(kuò)不出來,截?cái)鄶U(kuò)依舊不行。溫度梯度,模版量和循環(huán)次數(shù)都做了優(yōu)化,換了兩款高保酶,還是不行。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
銅蟲 (小有名氣)

新蟲 (初入文壇)
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擴(kuò)增不出來,是指無條帶?還是條帶大小不對(duì)?從描述上看,感覺是擴(kuò)增不出條帶。如果無條帶,可以先找一個(gè)確定能夠擴(kuò)增出來的基因作為陽性對(duì)照,排除模板、試劑或者操作問題,個(gè)人遇到過,最好換一批次模板。如果是條帶大小不對(duì),推測(cè)可能是是片段太長,或許分成三段會(huì)好一點(diǎn)。擴(kuò)出來以后再通過多片段重組或者PCR的方式連起來。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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