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予濃123

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求助各位大神，本人現(xiàn)在用Sephadex G-100純化糖蛋白，剛開始的時候，柱子平衡好之后第一次過柱子峰形正常，第二次跑的峰形就出現(xiàn)雜峰峰形，于是每次灌柱后只跑一次�，F(xiàn)在灌好柱子后柱子下出口放低出水，一旦抬高放到收集器上就不怎么流，達(dá)不到接收測量的量，不知道問題出現(xiàn)在哪里，希望各位指點一下，感激不盡

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1樓 2021-06-29 09:25:12

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fuyuandj86

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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

這個樹脂應(yīng)該是可以重復(fù)用的，不用每次都灌柱，可以試著用NaOH溶液清洗一下。
關(guān)于柱子不流，你是靠重力讓流動相流動，還是通過泵施加了壓力？如果純粹靠重力的話，出口管路抬得太高當(dāng)然就流不出來了，為啥不把接收器放在下面呢？

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2樓2021-06-29 09:41:44

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予濃123

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2樓: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-06-29 09:41:44
這個樹脂應(yīng)該是可以重復(fù)用的，不用每次都灌柱，可以試著用NaOH溶液清洗一下。
關(guān)于柱子不流，你是靠重力讓流動相流動，還是通過泵施加了壓力？如果純粹靠重力的話，出口管路抬得太高當(dāng)然就流不出來了，為啥不把接收 ...

謝謝你的回復(fù)，很感謝，我加了個蠕動泵為了可以自動走流動相，難道不是通過泵調(diào)流速嗎？什么時候要考慮接收器的位置呢？接收器目前和其他儀器一樣放在試驗臺上

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3樓2021-06-29 19:23:57

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3樓: Originally posted by 予濃123 at 2021-06-29 19:23:57
謝謝你的回復(fù)，很感謝，我加了個蠕動泵為了可以自動走流動相，難道不是通過泵調(diào)流速嗎？什么時候要考慮接收器的位置呢？接收器目前和其他儀器一樣放在試驗臺上...

不太理解你用的體系是什么樣子。建議要么連用hplc，用hplc的高壓泵。要么就簡易的方法，填個開放式的小柱子豎著放，靠重力讓液體留下來。
hplc高壓蠕動泵壓力足夠高的話，總歸是能流的呀。除非你的柱子堵了，那就要用NaOH等清洗，保存柱子的時候用20%乙醇，防止里面長菌。

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4樓2021-06-29 20:14:47

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4樓: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-06-29 20:14:47
不太理解你用的體系是什么樣子。建議要么連用hplc，用hplc的高壓泵。要么就簡易的方法，填個開放式的小柱子豎著放，靠重力讓液體留下來。
hplc高壓蠕動泵壓力足夠高的話，總歸是能流的呀。除非你的柱子堵了，那就 ...

鏈接: https://pan.baidu.com/s/1URQcfk5WHERXQxxdcNbJ0Q 提取碼: mp4c 復(fù)制這段內(nèi)容后打開百度網(wǎng)盤手機(jī)App，操作更方便哦
裝置是這樣的，麻煩您幫我康康，謝謝您

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5樓2021-06-29 22:39:38

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★ ★
予濃123: 金幣+2, ★有幫助, 好的，我試試，感謝您的幫助解答 2021-06-30 09:34:58

引用回帖:

5樓: Originally posted by 予濃123 at 2021-06-29 22:39:38
鏈接: https://pan.baidu.com/s/1URQcfk5WHERXQxxdcNbJ0Q 提取碼: mp4c 復(fù)制這段內(nèi)容后打開百度網(wǎng)盤手機(jī)App，操作更方便哦
裝置是這樣的，麻煩您幫我康康，謝謝您...

目測你用的這個蠕動泵是那種勁兒比較小的，壓力不太夠用。但是靠重力應(yīng)該是可以流下來的，只要你把上液面和下面出口的垂直距離設(shè)置得足夠高，P=ρgh，壓強(qiáng)就是和兩個液面垂直距離成正比。你現(xiàn)在液體的入口和出口都擺在桌子上處于同一水平面，所以自然就沒壓力了。找個架子把進(jìn)樣buffer的瓶子放在最上面，然后把接收器放地上。
這種樹脂就是流得比較慢，流速能到0.5ml/min就夠用了。

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6樓2021-06-30 08:54:48

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walking dead

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我只能說這個膠很軟，不好裝柱，反壓也挺大

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7樓2021-06-30 16:40:28

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7樓: Originally posted by walking dead at 2021-06-30 16:40:28
我只能說這個膠很軟，不好裝柱，反壓也挺大

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8樓2021-07-02 08:27:12

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