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melodiouso新蟲 (初入文壇)
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| 免疫小白，老板突然給了我兩篇paper讓我研究用elisa測(cè)細(xì)胞因子， 現(xiàn)在有一個(gè)問(wèn)題：取了脾組織然后制備了單細(xì)胞懸液以后，還需要再接著培養(yǎng)嗎？ 還是直接稀釋好濃度就可以當(dāng)做sample用試劑盒做了？ 我們的實(shí)驗(yàn)?zāi)康膽?yīng)該是探究做完別的實(shí)驗(yàn)的老鼠免疫因子的表達(dá)情況， 因?yàn)槲铱磒aper里面他們有加pma和ionomycin再孵育，不知道需不需要這一步。 謝謝各位�。�！ |
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2樓2020-11-21 14:40:22
melodiouso
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您好，謝謝幫助！我還是沒(méi)有太明白想再詳細(xì)問(wèn)您： ① 我看到有的paper protocol會(huì)直接用ripa裂解液加上勻漿器處理脾然后提取上清接著測(cè)，有的paper就是如我上面所說(shuō) 會(huì)制備成單細(xì)胞懸液并且控制好它的濃度，請(qǐng)問(wèn)這兩種方法都是可以的嗎？②在單細(xì)胞懸液的這一種方法中，有一篇paper提到了加pma那些，我搜了一下好像是為了刺激免疫因子的產(chǎn)生，您的意思是在我實(shí)驗(yàn)的前提下（檢測(cè)其他刺激或處理的影響）不需要加這些試劑對(duì)嗎？ 期待您的回復(fù)！ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
3樓2020-11-21 16:53:02
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做成單細(xì)胞懸液是因?yàn)樽髡呦胍纯椿罴?xì)胞在pma之類藥物刺激作用下的表達(dá)情況的變化，如果把細(xì)胞用ripa裂解了再往裂解液里加pma刺激是沒(méi)用的。 怎么設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)取決于你自己的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模唧w情況具體分析。 |
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melodiouso4樓2020-11-22 13:36:46
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5樓2020-11-22 17:43:45
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