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0010030335金蟲 (小有名氣)
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[求助]
有沒有哪位大神用過Qiagen（凱杰）的逆轉(zhuǎn)錄試劑盒？求幫助。 已有1人參與
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有沒有哪位大神用過Qiagen（凱杰）的逆轉(zhuǎn)錄試劑盒？求幫助。里面沒有Random 引物和Oligo 引物。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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GRUBBY_WU
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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從別的逆轉(zhuǎn)錄盒子里找，或者自己合成稀釋到對(duì)應(yīng)濃度，oligodt，random primer濃度20uM-50uM逆轉(zhuǎn)錄基本沒問題 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2019-07-04 22:45:15
0010030335
金蟲 (小有名氣)
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3樓2019-07-05 08:40:08
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直接20ul體系加個(gè)1ul應(yīng)該就沒問題。算的話，兩個(gè)都是濃度單位，uM等于umol/L，mol數(shù)等于質(zhì)量m除相對(duì)分子量M，堿基平均相對(duì)分子量320左右，一條oligo的相對(duì)分子量等于320xbp大小。假設(shè)是一段20bp隨機(jī)引物，換算就是x ug/mL=x/（320x20）umol/ml=x/（320x20）umol/10-3次L=1000x/（320x20）umol/L=1000x/（320x20）uM。每個(gè)堿基的相對(duì)分子量都是已知的，所以oligo的相對(duì)分子量是一個(gè)準(zhǔn)確值，上邊那個(gè)是估算。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2019-07-05 12:27:03
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